结合通用引物快速简便鉴定阳性克隆的PCR方法

本文核心词:阳性克隆。

结合通用引物快速简便鉴定阳性克隆的PCR方法

通用引物与载体多克隆住点两端序列互补,将目的片段构建入栽体pGEM-T Easy中,利用载体通用引物M13F和M13R结合片段特异引物进行菌液PCR反应.用PCR产物电泳结果来筛选阳性克隆并鉴定目的片段插入方向,同时能有效对短插入片段重组子进行筛选与鉴定.最终以DNA测序结果来验证,与测序结果一致,显示通用引物PCR方法对阳性克隆的筛选和鉴定优于传统酶切和普通PCR鉴定方法,能够弥补传统方法的’不足,且简便快速,可作为筛选和鉴定阳性克隆的有效手段.

作 者:崔静 黄爱龙 张文露 Cui Jing Hung Ailong Zhang Wenlu 作者单位:重庆医科大学病毒性肝炎研究所,感染性疾病分子生物学教育部重点实验室,重庆,400016 刊 名:生物技术通报 PKU英文刊名:BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年,卷(期):2008 “”(3) 分类号:Q78 关键词:通用引物PCR 鉴定 插入方向 短插入片段

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